长(zhǎng)时间的仿生(shēng)栽培和生态研究,使得羊肚(dù)菌的(de)发生规律和生理需求逐(zhú)渐为人们所掌握。一(yī)些羊肚菌爱好者和科技工(gōng)作者开始意识到菌种(zhǒng)在羊肚菌(jun1)驯化(huà)栽培中(zhōng)的重要性。这是(shì)从仿(fǎng)生栽培向人工栽培的重要(yào)转(zhuǎn)变。
菌种的驯化选(xuǎn)育、补料技术和人为(wéi)刺激诱发出菇是羊肚(dù)菌(jun1)人工栽培(péi)区别于(yú)仿生栽培的(de)重要标(biāo)志(zhì)。
实际上(shàng),20世纪80年代,美国科学家Ower就(jiù)模拟自(zì)然(rán)环境在实验(yàn)室(shì)内成功实(shí)现了羊肚菌出菇[33~36],随(suí)后(hòu)由其合作者Mills进(jìn)行了相对成功的工厂化栽(zāi)培应用[4]。
无论是民间还(hái)是(shì)官方(fāng)资料(liào)都(dōu)显示,我国(guó)的羊肚菌人(rén)工栽(zāi)培技术都明显(xiǎn)晚于Ower的技术(shù)专利。
蔡知桂等(děng)在2010年公布了一种羊肚菌栽培(péi)技(jì)术专利[37],技术流程(chéng)依次为栽培种的制作、培(péi)养(yǎng)料(liào)的制备(bèi)、播种、发菌管理及(jí)出菇管理等。值得注意的(de)是(shì),该专利要(yào)求在菌丝成熟之前至少进行一次营(yíng)养液补充,这可以认为是(shì)羊肚菌仿生(shēng)栽培向纯人(rén)工(gōng)栽培的过(guò)渡。赵琪(qí)等公布了一种梯(tī)棱羊(yáng)肚菌栽培方案(àn)和菌种制作方案的专利技术,首次(cì)提及所(suǒ)用的菌种是经过分子(zǐ)鉴定的梯(tī)棱羊肚菌(M.importuna)[38,39]。
2.1 菌(jun1)种(zhǒng)的选择
羊肚菌(jun1)子囊果(guǒ)具有明显的形态可塑(sù)性(xìng),因此其物种的(de)鉴(jiàn)定一(yī)直是一个难题。早期(qī)对
羊(yáng)肚菌菌种的选择和确定大(dà)多根据形态(tài)特(tè)征,保留下来的(de)模式标本(běn)和(hé)数(shù)据资料有限,因此,很难推定早期资料中的所用品种和现代分类系统的对应关系。近年来,应用分子(zǐ)系统发育学鉴定羊肚菌物种得到(dào)广泛的(de)认可[40~43]。王波和鲜灵对(duì)四川大邑(yì)县、崇(chóng)州市、郫县和(hé)涪(fú)城区的(de)人工(gōng)栽培品种进行形态特征(zhēng)的详细(xì)描述和分(fèn)子鉴(jiàn)定,结果发现,所(suǒ)有羊肚菌(jun1)品种的ITS-DNA序列与数据库(kù)中(zhōng)梯棱羊肚菌相似度达100%,而与(yǔ)羊肚(dù)菌属的其他物种相差(chà)甚远[44]。赵琪(qí)等在公(gōng)开的羊(yáng)肚菌(jun1)栽培专利中指出,所用的品种为梯棱羊(yáng)肚菌[38,39]。
自2012年起,我(wǒ)们在全国各地进行羊肚(dù)菌(jun1)的驯化栽培和标本采集整理工作,随后对来(lái)源(yuán)清晰的(de)4个商业推广菌株羊(yáng)肚菌1号、3号、6号和7号进行了详细的形态特征记录和DNA序(xù)列分(fèn)子鉴定分析。结果表明(míng),羊肚菌1号和3号是(shì)梯棱羊(yáng)肚菌,6号为六妹羊肚菌(M.
sextelata),7号为七(qī)妹(mèi)羊肚(dù)菌(M.septimelata),均属于(yú)黑(hēi)色羊肚(dù)菌支系(xì)[43]。其他品种是否可用于驯化(huà)栽培有待进行(háng)深(shēn)入研究,建议生产者在开(kāi)展羊(yáng)肚菌人工栽培时,应定向采集当(dāng)前已经应用的品(pǐn)种(zhǒng),经初筛、小(xiǎo)试和中试后(hòu),再进行大面(miàn)积的示(shì)范性栽(zāi)培(péi)和推广。
2.2 补料技术(shù)
在有目的有意识驯化(huà)菌种的基础上(shàng),“外源营(yíng)养袋”的(de)出现和广(guǎng)泛使用促进了羊肚菌(jun1)产业的健康发展,外源(yuán)营养袋技(jì)术是(shì)羊肚菌生产环节中的(de)最重要(yào)技术(shù)处(chù)理(lǐ),是羊肚菌(jun1)丰产的最重要“能量”支撑。
Ower曾(céng)详细论述外源(yuán)营养袋(dài)的技(jì)术原理(lǐ)和制作工艺,但在随后的(de)推广应用(yòng)中,并未被重(chóng)视和使用(注:Ower于1986年逝世,后期的推广由合(hé)作者Mills进(jìn)行)。Ower对(duì)其原理和适用方法的解(jiě)释是羊肚(dù)菌需要在(zài)营(yíng)养相(xiàng)对贫乏的环境中才能进行有性生殖,而其菌(jun1)丝自身储备的(de)能量不足(zú)以支撑其有性生(shēng)殖过程,因此需要(yào)从外界吸收新(xīn)的营养物质,同时需(xū)要在生产后期对新的营养物质(zhì)予以移除(chú),以使菌丝重新回到营(yíng)养贫(pín)乏状(zhuàng)态(tài)转而(ér)进行有(yǒu)性生殖。Ower利用培养(yǎng)菌核的培养料作为“外(wài)源(yuán)性营养物”进行(háng)补料(liào)操作[34~36]。
我国谭方河先生(shēng)最早使用外(wài)源营(yíng)养(yǎng)袋技术[4]。约(yuē)2000年(nián)前后,出于“不同菌丝的(de)配合”(不同“极性”的菌丝(sī)杂合)可能有助于出菇的(de)认识(shí),在菌丝萌发后(hòu),他采取在(zài)菌床上扣上接种(zhǒng)有另一类型羊肚菌菌种的菌袋,以实现(xiàn)两种菌(jun1)丝的融(róng)合,诱发出菇(gū),此方法比不“杂交”具有明显的增产(chǎn)效果(guǒ),该技术(shù)在早期曾被称为“菌(jun1)丝融合技术”。随(suí)后,谭方河先生又发现,只扣料(liào)袋(不接种)同样可以促(cù)进增产,因此就推翻(fān)了“菌丝融合的说法”,进而发展成为现今的外源营养袋技术。
2.3 保育催菇
催菇是(shì)羊肚菌栽培的重要环节(jiē),技术性较强(qiáng),其(qí)目的(de)是创造不利于(yú)羊肚(dù)菌继续(xù)营养生长的条件,使其转向生(shēng)殖生长,其中包括营养、水分(fèn)、湿度、温度、光线等刺激。
①营养(yǎng)刺(cì)激是指通过移除营养实现营养(yǎng)刺激,该技术(shù)也是Ower专利中强调的环节,可行的操(cāo)作是(shì),外源营养(yǎng)袋施放后20~25天移除(chú)外源营(yíng)养袋(dài)[34~36]。
②水分刺激是自然界(jiè)大型真菌(jun1)出菇的重要条(tiáo)件(jiàn)。水分可冲刷真菌分(fèn)泌(mì)的各种酶类物质(zhì),改变菌丝渗透(tòu)压,也是菌丝(sī)转向生(shēng)殖生长所需要湿润环境的重(chóng)要保证。具体(tǐ)做法是:撤袋之后,大水(shuǐ)浇灌,至地面完全湿透[1]。
③湿度控制包括土壤含水量和空气相对湿度,水(shuǐ)分刺激使土(tǔ)壤含水量达到饱和,随后控(kòng)制土壤水分在20%~30%,原(yuán)基发生前空(kōng)气(qì)湿度(dù)在85%~95% [1]。
④目前没有数据直接(jiē)支持(chí)温差(chà)刺激实(shí)现(xiàn)羊肚菌的生(shēng)殖生长(zhǎng),但大量数(shù)据表明,10 ℃左右的昼夜温差,有助于羊(yáng)肚菌出菇。主要通过白天闭棚增温,晚(wǎn)间掀开棚通风降温以加大温(wēn)差[1]。
⑤栽培(péi)经(jīng)验表明,光线也是影响出菇(gū)的一个(gè)重要(yào)指标,过强会抑制出菇(gū),可行的操作(zuò)是(shì)使用(yòng)4~6针的遮阳网进行遮阴处(chù)理。